📖 定义
DNA 连接酶是催化 DNA 片段之间形成磷酸二酯键的酶，在 DNA 复制、修复和基因工程中起关键作用。
🔑 关键概念
磷酸二酯键
连接 DNA 核苷酸之间的化学键
粘性末端连接
连接具有互补单链突出的 DNA 片段
平末端连接
连接平齐的 DNA 末端，效率较低
T4 DNA 连接酶
来自 T4 噬菌体，可连接粘性末端和平末端
E. coli DNA 连接酶
来自大肠杆菌，需要 NAD+ 作为辅因子
📌 核心知识点
- DNA 连接酶连接 DNA 片段的 3'-OH 和 5'-磷酸基团
- T4 DNA 连接酶是最常用的连接酶
- DNA 连接酶在 DNA 复制中连接冈崎片段
- 在基因工程中用于连接载体和插入片段
- DNA 连接酶需要 ATP 或 NAD+ 作为能量来源
🧬 蛋白质结构
📚 参考文献
- Lehman IR. DNA ligase: structure, mechanism, and function. Science, 1974